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技術(shù)文章

實驗室培養(yǎng)基制備要求

2021-02-10 11:03:07

  培養(yǎng)基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長。因為各種微生物對其營養(yǎng)要求不完全相同,培養(yǎng)目的的不同,各種培養(yǎng)基制備要求如下:

  1.根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取,然后溶于蒸餾水中,在使用前對應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進行質(zhì)量檢驗。

  2.PH測定及調(diào)節(jié):PH測定要在培養(yǎng)基冷至室溫時進行,因在熱或冷的情況下,其PH有一定差異,當(dāng)測定好時,按計算量加入堿或酸混勻后,應(yīng)再測試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準(zhǔn)確,否則會影響微生物的生長或影響結(jié)果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高,故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多,以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量,指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入。

  3.培養(yǎng)基需保持澄清,便于觀察細菌的生長情況,培養(yǎng)基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。

  4.盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。

  5.培養(yǎng)基的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營養(yǎng)價值,一般121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等,則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等,待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。

  6.每批培養(yǎng)基制備好后,應(yīng)做無菌生長試驗及所檢菌株生長試驗。如果是生化培養(yǎng)基,使用標(biāo)準(zhǔn)菌株接種培養(yǎng),觀察生化反應(yīng)結(jié)果,應(yīng)呈正常反應(yīng),培養(yǎng)基不應(yīng)貯存過久,必要時可置4℃冰箱存放。

  7.目前各種干燥培養(yǎng)基較多,每批需用標(biāo)準(zhǔn)菌株進行生長試驗或生化反應(yīng)觀察,各種培養(yǎng)基用相應(yīng)菌株生長試驗良好后方可應(yīng)用,新購進的或存放過久的干燥培養(yǎng)基,在配制時也應(yīng)測PH,使用時需根據(jù)產(chǎn)品說明書用量和方法進行。

  8.每批制備的培養(yǎng)基所用化學(xué)試劑、滅菌情況及菌株生長試驗結(jié)果、制作人員等應(yīng)做好記錄,以備查詢。

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